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客户通过阿仪网订购古朵T细胞亚群检测试剂盒：



T 细胞亚群检测试剂盒说明书：
一：试剂盒组成：
1. 防脱片剂2ml
2. 固定液10ml
3. A 小鼠抗人CD3 单抗1ml
B 小鼠抗人CD4 单抗1ml
C 小鼠抗人CD8 单抗1ml
4. 生物素标记羊抗小鼠IgG（ IgG/Bio） 1.5ml × 2
5. 碱性磷酸酶标记链霉卵白素（S-A/AP） 1.5ml × 2
6. A 底物增强剂（ 40×） 200μl
B 底物液（ 40× ） 200μl
C 底物缓冲液（ 10× ） 800μl
7. 细胞核复染液5ml
8. 封片剂1ml
9. 记号笔1 支
10. PBS 2 包（1000ml）


二：标本制备：
取肝素抗凝（25μl/ml）的静脉血1~2ml，PBS 稀释1-2 倍后，沿装有等量淋巴细
胞分离液的试管壁混匀缓慢加至液面上层，保持两种液体界面清晰，离心（2000
转/分）15-20 分钟，吸取两液面交界处的单个核细胞层，加5 倍PBS，离心（1000
转/分）5 分钟，弃上清液，沉淀即为单个核细胞。利用试管中剩余的少许回流
液体（约一滴）混匀细胞，制成单个核细胞悬液。滴30μl 细胞悬液于载玻片上，
静置2 分钟使细胞下沉粘附于玻片上，吸去液体，快速吹干或37℃温箱1 小时
烤干。或用PBS 将单个核细胞调至2×105 个/ml，离心涂片机1000 转离心1-2
分钟制片，快速吹干或37℃温箱1 小时烤干。涂片前取防脱片剂5-10μl 均匀推
片，亦可用棉签粘取防脱片剂均匀涂于干净玻片上，待干后制备细胞涂片，以防
掉片。


三：显色剂的配制：
分别取A 液25ul，B 液25ul 置于干净试管中混匀，室温放置2-5 分钟，加1ml
蒸馏水，混匀，再加C 液100ul 待用。
使用前，根据所需显色剂用量，按照以上比例现配现用。


四：标本染色：
1. 充分干燥（室温2 小时以上或过夜）的细胞涂片先用记号笔在标本外画圈，
然后滴加固定液50μl，室温静置2-3 分钟，用PBS 淋洗，擦干玻片背面及细胞
外的PBS。