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酶联免疫法的优缺点

点击次数:12307 发布时间:2013/7/31 10:14:44

 基本原理
   ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
   ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性
,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,*后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
在这种测定方法中有3种必要的试剂:
     ①固相的抗原或抗体
     ②酶标记的抗原或抗体
     ③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不
同类型的检测方法。
   优点:免疫学检测技术具有检测速度快费用低廉仪器简单易携灵敏度高选择性强
优点,可用于现场检验。它将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异相结合,以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试,所以具有很高的灵敏度
  缺点:1.只是诊断的辅助手段,特异性和灵敏性有待提高。           
               2.操作过程有些繁琐,反应血药时间,不能一蹴而就。

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